Salmonella spp. prevalence, antimicrobial resistance and risk factor determination in Colombian swine farms / Salmonella spp. prevalência, resistência antimicrobiana e determinação de fatores de risco em granjas suínas colombianas

To determine Salmonella spp. prevalence/seroprevalence, antimicrobial resistance patterns and risk factor identification associated with its presence in Colombian swine farms. 504 samples (Faeces, swabs and environment samples) were obtained from 21 farms distributed in four geographical regions in Colombia. Salmonella spp. microbiological and molecular detection were determined by two Salmonella spp. MDS3M™ and MALDI-TOF MS assays, respectively. In addition, for serological evaluation 231 serum samples were analyzed employing ELISA Salmonella Pigtype®-Salmonella Ab (QUIAGEN®). Additionally, 41 isolates were tested for antimicrobial susceptibility using broth microdilution technique (Panel B1016-180 Beckman Coulter NC72®) and verified with WHONET 2016 software. Risk factors were assessed from a survey and analyzed for statistical significance by U Mann-Whitney test. An 8.9% prevalence (n=45) and 38.1% (n=88) seroprevalence were determined. All isolates presented 100% antimicrobial susceptibility against amikacin. However, resistance against penicillin, tetracycline, cefuroxime and trimethoprim/sulfamethoxazole was present in more than 50% of evaluated strains. Risk factors associated with Salmonella spp. presence were surface water use, rough-surfaced on floors, presence of hoppers as feeders and worker's boots. Bacteria were present in animals and environmental samples from evaluated farms. Animal contact and/or exposure with the microorganism were also evident in obtained serological response. Bacteria presence depended on management practices and infrastructure, likewise antibiotic use, supplemented in the diet may have induced an increase in Salmonella spp. antimicrobial resistance.(AU)

Para determinar Salmonellaspp. prevalência/soroprevalência, padrões de resistência antimicrobiana e identificação de fatores de risco associados à sua presença em granjas suínas colombianas. Foram obtidas 504 amostras (fezes, zaragatoas e amostras do ambiente) de 21 fazendas distribuídas em quatro regiões geográficas da Colômbia. Salmonella spp., a detecção microbiológica e molecular foi determinada por 2 Salmonella spp. Ensaios MDS3M™ e MALDI-TOF MS, respectivamente. Além disso, para avaliação sorológica, foram analisadas 231 amostras de soro empregando ELISA Salmonella Pigtype® - Salmonella Ab (QUIAGEN®). Além disso, 41 isolados foram testados quanto à suscetibilidade antimicrobiana usando a técnica de microdiluição em caldo (Painel B1016-180 Beckman Coulter NC72®) e verificados com o software WHONET 2016. Os fatores de risco foram avaliados em uma pesquisa e analisados quanto à significância estatística pelo teste U Mann-Whitney. Foram determinadas prevalências de 8,9% (n=45) e 38,1% (n=88). Todos os isolados apresentaram 100% de suscetibilidade antimicrobiana à amicacina. No entanto, resistência à penicilina, tetraciclina, cefuroxima e trimetoprim/sulfametoxazol estava presente em mais de 50% das cepas avaliadas. Fatores de risco associados à Salmonella spp., presença de uso de água de superfície, superfície áspera no chão, presença de tremonhas como alimentadores e botas de trabalho. Bactérias estavam presentes em animais e amostras ambientais de fazendas avaliadas. O contato animal e/ou a exposição ao microrganismo também foram evidentes na resposta sorológica obtida. A presença de bactérias dependia de práticas de manejo e infraestrutura, assim como o uso de antibióticos suplementados na dieta pode ter induzido um aumento de Salmonella spp. resistência antimicrobiana.(AU)

Electroforesis en Gel de Campo Pulsado (PFGE) para la diferenciación molecular de Listeria monocytogenes / Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) for the molecular differentiation of Listeria monocytogenes

En Colombia no es obligatoria la notificación deL. monocytogenes en alimentos, pero se vigilan los alimentos dealto riesgo. Clínicamente se reportan como microorganismoGram-positivo sólo cuando causan meningitis. L. monocytogeneses un patógeno intracelular, transmitido por alimentos, letalpara humanos y animales, que causa Listeriosis; enfermedadque genera varios brotes en el mundo, con pérdidashumanas y económicas. Pocos trabajos en Colombia hanlogrado identificar y serotipificar molecularmente losaislamientos, lo que sólo permite distribuir teóricamentelos serotipos en linajes. Esta revisión se limita a mostrarcaracterísticas del patógeno, su importancia en salud públicay en la industria de alimentos, generalidades de la PFGECHEF;identificando el protocolo estandarizado de trabajoy las enzimas de restricción adecuadas para cortar el ADN.Se encontró que la combinación de enzimas XbaI-AscI,seguida de ApaI es la que ofrece mejores resultados en ladiferenciación de los aislamientos; agrupándolos por linajes;mostrando variaciones intra-serotipo y que en varios paíseslatinoamericanos se analizan los resultados a través dePulseNet, lo que garantiza la comparación de los patronesde PFGE en igualdad de condiciones...

The reporting of L. monocytogenes in food in Colombia is not a mandatory; however, foods consideredhigh-risk are monitored, and the organism is only reported clinically as Gram-positive when it causesmeningitis. L. monocytogenes is a foodborne, intracellular, pathogen which causes listeriosis, a disease lethalto humans and animals. Outbreaks of this disease worldwide can bring about human and economiclosses. Only a few studies in Colombia have been able to identify and molecularly serotype isolatesallowing only the theoretical distribution of serotypes by lineage. This review explains the characteristicsof the pathogen, its importance in public health and in the food industry, and provides an overview ofPFGE-CHEF; identifying the standard work protocol and the appropriate restriction enzymes to cutDNA. We found that the enzyme combination, XbaI-AscI, followed by ApaI offers the best results todifferentiate isolates, by grouping them by lineages, and displaying intra-serotype variations. Additionally,we found that in several Latin American countries the results are analyzed using PulseNet; this ensuresthe comparison of PFGE patterns in equivalent conditions...

Na Colômbia não há uma notificação compulsóriade L. monocytogenes em alimentos, mas alimentos de altorisco são monitorados. Clinicamente, são relatados comoorganismos Gram-positivos apenas quando eles causammeningite. L. monocytogenes é um patógeno intracelularde origem alimentar, letal para seres humanos e animais,que causa a listeriose, que gera surtos em todo o mundo,com perdas humanas e econômicas. Poucos trabalhos naColômbia identificaram e sorotipificaram molecularmenteos isolados, que só permite a distribuição de sorotiposteoricamente em linhagens. Esta avaliação é limitada amostrar características do patógeno, sua importância nasaúde pública e na indústria de alimentos, e uma visãogeral do PFGE-CHEF; identificar o protocolo-padrão detrabalho e enzimas de restrição apropriadas para cortar oADN. Verificou-se que a combinação de enzimas XbaIAscI,seguido por ApaI representa a combinação de enzimasque ofereceu melhores resultados na diferenciação dosisolados, agrupando-a por linhagens, mostrando a variaçãointra-serotipo e que, em muitos países da América Latina,os resultados são analisados através PulseNet, que asseguraa comparação de padrões de PFGE em igualdade decondições...

Efecto de tiempo y temperatura de cocción en chorizo inoculados artificialmente con Listeria monocytogenes / Effect of cooking time and temperature on sausages artificially inoculated with Listeria monocytogenes / Efeito do tempo e temperatura de cozimento em lingüiças inoculadas artificialmente com Listeria monocytogenes

Objetivo. Determinar si los tiempos utilizados por los consumidores para la cocción de chorizos son suficientes para la inactivación de Listeria monocytogenes inoculada artificialmente en este producto. Materiales y métodos. Se realizó una encuesta a 50 amas de casa para preguntar sobre los hábitos de preparación de los chorizos. Se analizaron 60 muestras de chorizos a las que se les inocularon concentraciones de 10³ UFC g-1 de un pool de 5 cepas de L. monocytogenes, se aplicaron los procedimientos de cocción indicados por la encuesta y se hizo recuento inmediatamente. Adicionalmente, se realizó una prueba complementaria donde se inocularon 20 muestras de chorizos con poblaciones de 10³ UFC g-1 y se sometieron a 72 y 73°C durante 30 segundos. Resultados. Mediante la encuesta se logró establecer que 15 minutos de cocción y 5 minutos de fritura es la forma más frecuente de preparación por parte de los consumidores, se logró establecer que el tiempo y las condiciones utilizadas en este ensayo tuvieron un efecto estadísticamente significativo (0,016) sobre la población inoculada. En el ensayo complementario los datos estadísticos (p: 0,0001) indicaron que temperaturas internas de 73°C son suficientes para la inactivación de este patógeno a nivel industrial. Conclusión. Tiempos de 15 minutos de cocción y 5 minutos de fritura son suficientes para inactivar concentraciones de 10³ g-1 de Listeria monocytogenes inoculadas artificialmente en chorizos.

Objective. To find whether the cooking times traditionally used by consumers are enough to inactivate Listeria monocytogenes artificially inoculated into sausages. Materials and methods. A survey asking about sausage cooking habits was completed with 50 housewives. We analyzed 60 samples of sausages previously inoculated with 10³ CFU g-1 from a pool of 5 strains of L. monocytogenes, then the cooking procedures described in the survey were applied to the samples, and counting was done immediately after. Additionally, a complementary test was carried out by inoculating 20 samples of sausages with 10³ CFU g-1 and exposing them to 72°C and 73°C for 30 seg. Results. The survey showed that 15 minute boiling and 5 minute frying are the most frequent ways of preparing sausages by consumers. We established that the time and cooking conditions used in our assay had a statistically significant effect (p: 0.016) on the inoculated samples. In the complementary assay, statistical data (p: 0.0001) indicated that internal temperatures of 73°C are enough to inactivate the pathogen at an industrial scale. Conclusion. Cooking by 15 minute boiling and 5 minute frying are enough to inactive concentrations of 10³ g-1 of Listeria monocytogenes artificially inoculated into sausages.

Objetivo. Determinar se o tempo utilizado pelos consumidores para cozinhar lingüiças são suficientes para a inativação de Listeria monocytogenes inoculada artificialmente neste produto. Materiais e métodos. Foram realizadas entrevistas a 50 donas de casa para perguntar sobre os hábitos de preparação das lingüiças. Foram analisadas 60 amostras de lingüiças para as quais foram inoculadas concentrações de 10³ UFC g-1 de um pool de 5 cepas de L. monocytogenes, foram utilizados procedimentos de cozimento indicados pelas entrevistas e foi feita uma contagem imediatamente. Além disso, foi realizada uma prova complementaria inoculando 20 amostras de lingüiças com populações de 10³ UFC g-1 e submetidas a 72 e 73°C por 30 segundos. Resultados. Através das entrevistas foi estabelecido que 15 minutos de cozimento e 5 minutos de fritura é a forma mais freqüente de preparação por parte dos consumidores, foi estabelecido que o tempo e as condições utilizadas neste estudo foi estatisticamente significativa (0,016) sobre a população inoculada. Na prova complementaria os dados estatísticos (p = 0,0001) indicaram que temperaturas internas de 73°C são suficientes para a inativação deste patógeno ao nível da indústria. Conclusão. Tempo de 15 minutos de cozimento e 5 minutos de fritura são suficientes para desativar as concentrações de 10³ g-1 de Listeria monocytogenes inoculadas artificialmente em lingüiças.